Los banqueros alemanes Ehinger y Welser se asociaron en 1517 manteniendo buenas relaciones con la corona española por Carlos I. Esta unión entre banqueros hizo que Ambrosio Alfinger se trasladara a España siendo nombrado representante de ellos en Sevilla. Esto permitió la autorización por parte del monarca de que los alemanes obtuvieran licencia para explorar territorio americano, al tener la Corona deudas con dichos banqueros.

Firmarían unas capitulaciones con la corona, nombrando a Alfinger jefe de la expedición, que zarpó desde Sanlúcar de Barrameda el 27 de octubre de 1528 al mando de una flota de 5 naves y unos 450 hombres. Partiría con el cargo de Gobernador y Capitán General de la recién creada Provincia de Venezuela, donde llegó en marzo de 1529. Se instaló en Santa Ana de Coro, donde tuvo conocimiento de la existencia del Dorado, abandonaría Santa Ana con una fuerza de unos 220 hombres y un gran número de indígenas, llegando a fundar la ciudad de Maracaibo, explorando el lago del mismo nombre. Sera el primero en llegar a la zona norte de Colombia atravesando la selva. Sería un desastre su expedición perdiendo mucho de sus hombres. Llegaría al cauce del rio Magdalena recaudando en aquellas tierras un considerable botín. De vuelta a Santa Ana de Coro, Ambrosio Alfinger encontraría la muerte en mayo de 1533.